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1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時(shí),顏色的強(qiáng)度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),這就是的比爾朗伯定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設(shè)計(jì)了*臺(tái)比色計(jì)。到1918年,美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局制成了*臺(tái) 紫外可見分光光度計(jì) 。此后,紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大。
從儀器理論上講,各種紫外可見分光光度計(jì),都是根據(jù)比耳定律設(shè)計(jì)的;而比耳定律研究的是在平行光、單色光的條件下,物質(zhì)對(duì)光的吸收。但是,紫外可見分光光度計(jì)的單色器不可能得到真正的單色光。并且,單色器系統(tǒng)不同,它產(chǎn)生的單色光的純度(光譜帶寬)也不同,并且光通過物質(zhì)時(shí),也不可能是真正的平行光。因此,嚴(yán)格地說,實(shí)際工作中,任何紫外可見分光光度計(jì),都不可能真正滿足比耳定律。所以,紫外可見分光光度計(jì)都是針對(duì)近似平行光、近似單色光的條件設(shè)計(jì)的。所以,就看誰設(shè)計(jì)、制造儀器zui能滿足或接近比耳定律(或產(chǎn)生的比耳定律的偏離zui?。?,誰的儀器到了使用者手里,由于非平行光或非單色光產(chǎn)生的分析誤差zui小,誰的儀器就(當(dāng)然還有雜散光、噪聲、穩(wěn)定性等要求)。這就是從儀器學(xué)理論,去看紫外可見分光光度計(jì)的設(shè)計(jì)、制造誤差的zui根本、zui本質(zhì)的問題;也是使用者從儀器學(xué)理論去看紫外可見分光光度計(jì)的分析誤差的zui根本、zui本質(zhì)的問題。
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